無(wú)論是在同一實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行多次相同實(shí)驗(yàn),還是不同實(shí)驗(yàn)室間開(kāi)展對(duì)比研究,使用相同規(guī)格的
制備色譜柱空柱管都能得到相近的色譜分析結(jié)果。這一特性減少了實(shí)驗(yàn)誤差,提高了數(shù)據(jù)的可信度和可比性,為科學(xué)研究和質(zhì)量控制工作提供了有力支持。制造工藝優(yōu)化了空柱管的內(nèi)部結(jié)構(gòu),有效降低了樣品擴(kuò)散和渦流擴(kuò)散等不良影響,從而實(shí)現(xiàn)了高柱效。同時(shí),其材質(zhì)優(yōu)良、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,能夠承受長(zhǎng)時(shí)間、高強(qiáng)度的使用,即使在頻繁的進(jìn)樣和復(fù)雜的樣品基質(zhì)沖擊下,依然保持良好的性能狀態(tài),大大降低了使用成本和維護(hù)頻率。
制備色譜柱空柱管的使用注意事項(xiàng):
1.活化與老化處理
-新柱使用前:需要進(jìn)行活化(老化)處理。一般來(lái)說(shuō),新反相制備柱要用純甲醇沖洗約30個(gè)柱體積,再更換成能與檢測(cè)流動(dòng)相互溶的流動(dòng)相沖洗約30個(gè)柱體積,用流動(dòng)相穩(wěn)定系統(tǒng)至基線(xiàn)平衡。這有助于去除生產(chǎn)過(guò)程中殘留的雜質(zhì),使柱子達(dá)到最佳的工作狀態(tài)。
2.控制柱溫
-溫度限制:嚴(yán)格遵守柱子的最高使用溫度規(guī)定,避免超過(guò)此溫度范圍。過(guò)高的溫度可能會(huì)導(dǎo)致固定相流失、柱床結(jié)構(gòu)改變等問(wèn)題,從而影響柱效和分離效果。
3.樣品預(yù)處理
-過(guò)濾除雜:樣品應(yīng)經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)念A(yù)處理,如過(guò)濾去除顆粒物,以防止堵塞或污染色譜柱。大顆粒的物質(zhì)可能會(huì)損壞柱內(nèi)的填料結(jié)構(gòu),而雜質(zhì)則可能吸附在填料表面,降低柱效。
4.流動(dòng)相管理
-脫氣操作:流動(dòng)相需脫氣,防止氣泡進(jìn)入影響柱效。氣泡會(huì)在柱內(nèi)形成氣穴,干擾樣品的傳質(zhì)過(guò)程,導(dǎo)致峰形展寬、分離度下降等問(wèn)題。
-pH控制:嚴(yán)格控制流動(dòng)相pH在色譜柱耐受范圍內(nèi)。不同基質(zhì)的填料具有不同的pH適用范圍,超出范圍可能會(huì)引起鍵合相水解、硅膠溶解等不可逆反應(yīng),特別是在溫度較高時(shí),會(huì)使柱效迅速降低而報(bào)廢。
-純度要求:確保流動(dòng)相含有微量不溶性雜質(zhì)顆粒,否則很容易在柱頭部位被截留,久而久之造成色譜柱機(jī)械性堵塞,引起柱壓升高而無(wú)法正常使用。
5.壓力穩(wěn)定性
-避免波動(dòng):在使用過(guò)程中要避免劇烈的壓力波動(dòng),防止柱床塌陷。突然的壓力變化可能會(huì)破壞柱內(nèi)填料的均勻性和緊密性,影響分離效果。
6.保存與維護(hù)
-沖洗與封存:使用后用合適溶劑沖洗,不用時(shí)封住兩端以防污染和氧化。這樣可以延長(zhǎng)柱子的使用壽命,保持其性能穩(wěn)定。
-定期清洗:根據(jù)使用情況定期對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗,以去除積累的雜質(zhì)和污染物。但要注意選擇合適的清洗方法和溶劑,避免對(duì)柱子造成損害。
7.防止死體積產(chǎn)生
-正確填充:在填充固定相時(shí),要保證裝填緊密均勻,避免產(chǎn)生死體積。死體積會(huì)導(dǎo)致樣品擴(kuò)散加劇,降低分離效率。同時(shí),柱兩端要用玻璃棉或石英棉塞緊,位置恰當(dāng),防止固定相漏出且不產(chǎn)生額外的死體積。